2021年9月14日,海南大学园艺学院汪志伟教授团队 “一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法” 的发明专利历时三年获得授权(专利号ZL 2018 1 1265038.6),汪志伟教授为第一发明人。
空心菜(Ipomoea aquatica Forsk)又称蕹菜,属于旋花科甘薯属草本植物,既能水生也能陆生。空心菜具有耐高温高湿,生长速度快,不定根发达等特性,是夏季重要叶菜,但空心菜种子大量依赖进口。
课题组聚焦空心菜分子遗传改良重要技术难题开展深入系统研究。前不久发布的首个空心菜高质量参考基因组(The chromosome-based genome provides insights into the evolution in water spinach, 2021, Scientia Horticulturae, Volume 289, 110501)解决了基因组数据缺乏的问题。本次授权的发明专利为遗传转化解析空心菜重要功能基因提供了关键技术支撑。下一步,课题组将利用专利技术构建空心菜高效遗传转化体系,解析空心菜重要性状形成的分子机理,克隆重要基因,为空心菜分子遗传改良提供重要基因资源。
本发明的要点如下:
无菌苗的培育:选取饱满的空心菜种子,灭菌后接种于生苗培养基暗培养至种子露白后,进行正常光照培养,所述生苗培养基为MS基本培养基上添加0.05%含量的PPM(植物组织培养抗菌剂);
不定芽的诱导:待无菌苗长出茎段后,切取无菌苗茎秆第一节间(特指仅子叶节和第一片真叶节之间的部分,无芽点)作为外植体,接种于不定芽诱导的诱芽培养基上,20 d后第一节间部位开始诱导产生不定芽,诱芽培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA;
不定芽的生根培养:将诱导得到的不定芽自基部切下作为外植体,接种到生根培养基中进行生根诱导,2 d后开始生根,10 d后长出健壮的根系,生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA;
炼苗和移栽:待空心菜再生苗生长状况良好时,在培养室内将其瓶口松开,炼苗1 d后,将植株从培养基中取出,清水洗净根部残留的培养基,移栽到营养钵中,放置于人工培养箱中,培养室温度为24℃,光照强度为2500 lux,光照时间为16 h/d,1周后转移到室外正常管理。